Millipore密理博Ultrafree-DA離心超濾管
在單次 10 分鐘離心操作中，可從瓊脂糖凝膠條中回收 100bp 至 10,000bp 的 DNA。 該試劑盒包含預(yù)裝好，帶瓊脂糖凝膠破碎管、微型離心管的過(guò)濾裝置以及改良的 TAE 凝膠回收緩沖液（干劑）。
該裝置通過(guò)壓縮凝膠從瓊脂糖中回收 DNA 。 離心力使凝膠結(jié)構(gòu)破碎，將瓊脂糖擠過(guò)凝膠破碎管的小孔變成漿狀噴入樣品過(guò)濾杯。
對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用，包括克隆、放射性或熒光 DNA 測(cè)序，所制備的 DNA 不需要進(jìn)一步純化。 因?yàn)榄傊悄z電泳有很強(qiáng)的分離能力，PCR 之后產(chǎn)生的常常會(huì)干擾克隆或測(cè)序的大大小小的非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物就能完全去除
- 手動(dòng)時(shí)間少
- 只需 10 分鐘離心
- 回收全功能 DNA
實(shí)驗(yàn)方案
| 1. |
通過(guò)瓊脂糖凝膠將 PCR 產(chǎn)物或其它 DNA 進(jìn)行常規(guī)電泳分離之后，切下所需的條帶。 |
| 2. |
將凝膠條放入預(yù)先裝好的裝置。 注：此實(shí)驗(yàn)方案對(duì)于低熔點(diǎn)瓊脂糖不適合。 |
| 3. |
5,000xg 離心 10 分鐘，膠條呈漿狀噴入濾杯。 |
| 4. |
將樣品過(guò)濾杯和凝膠破碎管丟棄之后，可將 DNA 儲(chǔ)存于帶蓋的濾過(guò)液管中。 |
性能
測(cè)序圖譜
用 Montage 凝膠回收試劑盒純化 pUC18 凝膠片段后，再進(jìn)行自動(dòng)熒光測(cè)序的結(jié)果。 測(cè)序采用 ABI PRISM® Dye Terminator 測(cè)序即時(shí)反應(yīng)試劑盒生成測(cè)序結(jié)果，此試劑盒含有 AmpliTaq DNA 聚合酶 (Applied Biosystems)。 測(cè)序結(jié)果的提供者為 Jeff McConnell，Director of Genomic Services，Cleveland Genomics，Cleveland，Ohio。
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